微生物限度檢測儀器的原理和應用範圍

　微生物的檢測，無論在理論研究還是在生產(chan) 實踐中都具有重要的意義(yi) ，本文對生長量測定法、微生物計數法、生理指標法和商業(ye) 化快速微生物檢測簡要介紹了利用微生物重量，體(ti) 積，大小，生理代謝物等指標的二十餘(yu) 種常用的檢測方法，簡要介紹了這些方法的原理，應用範圍和優(you) 缺點。
　　一個(ge) 微生物細胞在合適的外界條件下，不斷的吸收營養(yang) 物質，並按自己的代謝方式進行新陳代謝。如果同化作用的速度超過了異化作用，則其原生質的總量（重量，體(ti) 積，大小）就不斷增加，於(yu) 是出現了個(ge) 體(ti) 的生長現象。如果這是一種平衡生長，即各細胞組分是按恰當的比例增長時，則達到程度後就會(hui) 發生繁殖，從(cong) 而引起個(ge) 體(ti) 數目的增加，這時，原有的個(ge) 體(ti) 已經發展成一個(ge) 群體(ti) 。隨著群體(ti) 中各個(ge) 個(ge) 體(ti) 的進一步生長，就引起了這一群體(ti) 的生長，這可從(cong) 其體(ti) 積、重量、密度或濃度作指標來衡量。微生物的生長不同於(yu) 其他生物的生長，微生物的個(ge) 體(ti) 生長在科研上有困難，通常情況下也沒有實際意義(yi) 。微生物是以量取勝的，因此，微生物的生長通常指群體(ti) 的擴增。微生物的生長繁殖是其在內(nei) 外各種環境因素相互作用下的綜合反映。因此生長繁殖情況就可作為(wei) 研究各種生理生化和遺傳(chuan) 等問題的重要指標，同時，微生物在生產(chan) 實踐上的各種應用或是對致病，黴腐微生物的防治都和他們(men) 的生長抑製緊密相關(guan) 。所以有必要介紹一下微生物生長情況的檢測方法。既然生長意味著原生質含量的增加，所以測定的方法也都直接或間接的以次為(wei) 根據，而測定繁殖則都要建立在計數這一基礎上。微生物生長的衡量，可以從(cong) 其重量，體(ti) 積，密度，濃度，做指標來進行衡量。
　　1. 微生物計量法
　　1.1 體(ti) 積測量法
　　又稱測菌絲(si) 濃度法，通過測定體(ti) 積培養(yang) 液中所含菌絲(si) 的量來反映微生物的生長狀況。方法是，取量的待測培養(yang) 液（如10 mL）放在有刻度的離心管中，設定的離心時間（如5 min）和轉速（如5000 rpm），離心後，倒出上清夜，測出上清夜體(ti) 積為(wei) v，則菌絲(si) 濃度為(wei) （10-v）/10。菌絲(si) 濃度測定法是大規模工業(ye) 發酵生產(chan) 上微生物生長的一個(ge) 重要監測指標。這種方法比較粗放，簡便，快速，但需要設定一致的處理條件，否則偏差很大，由於(yu) 離心沉澱物中夾雜有一些固體(ti) 營養(yang) 物，結果會(hui) 有偏差。
　　稱幹重法
　　可用離心或過濾法測定。一般幹重為(wei) 濕重的10~20%。在離心法中，將體(ti) 積待測培養(yang) 液倒入離心管中，設定的離心時間和轉速，進行離心，並用清水離心洗滌1~5次，進行幹燥。幹燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘幹，或采用紅外線烘幹，也可在80 ℃或40 ℃下真空幹燥，幹燥後稱重。如用過濾法，絲(si) 狀真菌可用濾紙過濾，細菌可用醋酸纖維膜等濾膜過濾，過濾後用少量水洗滌，在40 ℃下進行真空幹燥。稱幹重發法較為(wei) 煩瑣，通常獲取的微生物產(chan) 品為(wei) 菌體(ti) 時，常采用這種方法，如活性幹酵母（Activity Dry Yeast, ADY）,一些以微生物菌體(ti) 為(wei) 活性物質的飼料和肥料。
　　1.3 比濁法
　　微生物的生長引起培養(yang) 物混濁度的增高。通過紫外分光光度計測定波長下的吸光值，判斷微生物的生長狀況。對某一培養(yang) 物內(nei) 的菌體(ti) 生長作定時跟蹤時，可采用一種特製的有側(ce) 臂的三角燒瓶。將側(ce) 臂插入光電比色計的比色座孔中，即可隨時測定其生長情況，而不必取菌液。該法主要用於(yu) 發酵工業(ye) 菌體(ti) 生長監測。如使用UNICO公司的紫外-可見分光光度計，在波長600 nm處用比色管定時測定發酵液的吸光光度值OD600，以此監控E.coli的生長及誘導時間。
　　1.4 菌絲(si) 長度測量法
　　對於(yu) 絲(si) 狀真菌和一些放線菌，可以在培養(yang) 基上測定時間內(nei) 菌絲(si) 生長的長度，或是利用一隻一端開口並帶有刻度的細玻璃管，到入合適的培養(yang) 基，臥放，在開口的一端接種微生物，一段時間後記錄其菌絲(si) 生長長度，借此衡量絲(si) 狀微生物的生長。