解答微生物限度檢查儀檢測時的常見問題

解答微生物限度檢查儀(yi) 檢測時的常見問題

微生物限度檢查儀(yi) 采用不鏽鋼金屬材料製成，配有內(nei) 置進口隔膜液泵，不需外接抽濾瓶，液體(ti) 直接通過隔膜液泵排除，減少了抽濾瓶使用上的繁瑣，避免了連接不好造成抽濾速度慢等缺點。工作原理是將供試品注入微生物限度培養(yang) 器內(nei) ，通過檢驗儀(yi) 自帶內(nei) 置進口隔膜液泵負壓抽濾，將供試品中微生物截留在濾膜上，用取膜器取出濾膜，轉移至配置好的固體(ti) 培養(yang) 基上，菌麵朝上，平貼。蓋上蓋子形成封閉的培養(yang) 盒，置於(yu) 相應的恒溫培養(yang) 箱內(nei) 培養(yang) 並計數。以下內(nei) 容解答微生物限度檢查儀(yi) 檢測時的常見問題：
一、梭菌檢查中需置厭氧條件下培養(yang) 48小時，是否指在厭氧培養(yang) 箱中？
答：需要在厭氧培養(yang) 裝置中進行培養(yang) ，未必是厭氧培養(yang) 箱。
二、常規的監督抽樣檢品（包括原料）在進行微生物限度檢查時，是否要進行活蟎檢查並在原始記錄與(yu) 報告書(shu) 中體(ti) 現？
答：需要進行檢查。可以在原始記錄中體(ti) 現，報告書(shu) 上可以不出現，除非當發現有活蟎檢出。
三、包裝材料的大腸埃希菌檢查？
答：根據包裝材料的不同，大腸埃希菌的檢查方法大致有兩(liang) 種，一種是將浸提液合並後，取一部分，接種膽鹽乳糖培養(yang) 基進行檢查；另一種是將浸提液合並後，薄膜過濾，然後按規定的方法檢驗。
四、藥包材微生物限度檢查規定了合格質量水平，通常產(chan) 量下取樣8個(ge) ，要求8個(ge) 瓶子均符合規定，如何進行？
答：每個(ge) 瓶子分別進行實驗。
五、控製菌檢查方法驗證時，采用多種方法均未檢出控製菌，如何處理？
答：在確保所使用的各種方法都沒有錯誤的情況下，如果仍無法使試驗菌生長，則應該采用薄膜過濾法進行檢查。理由是該方法能夠大程度地去除產(chan) 品的抑菌作用。
六、大腸埃希菌具體(ti) 操作規程？
答：參見藥品檢驗標準操作規程。
七、動物組織及動物類原藥材的提取物入藥，是否需要檢沙門菌？
答：需要進行沙門菌檢查。
八、製劑通則中，沒有微生物檢查項目的，是否可不進行微生物項目檢測？
答：可以。主要是二部製劑通則中口服片劑、膠囊劑、丸劑和顆粒劑。
九、在細菌、黴菌和酵母菌計數中，適用性檢查細菌是培養(yang) 48小時，黴菌和酵母菌是培養(yang) 72小時，供試品檢查中細菌是培養(yang) 3天，黴菌和酵母菌是培養(yang) 5天，那方法驗證中應參照哪個(ge) 時間進行培養(yang) 。
答：應按照供試品檢驗時的條件，即細菌3天，黴菌和酵母菌5天。
十一、關(guan) 於(yu) 藥典菌落計數結果的判斷還存在疑義(yi) ，望能舉(ju) 例說明。
答：不清楚所指的存在疑義(yi) 是指哪方麵。2010年版對結果報告進行了較大篇幅的修訂，目前的規定應該比05版為(wei) 清晰、明確。
十二、需做沙門菌檢驗樣品量的確定？
答：10g（ml）用於(yu) 樣品計數檢驗和其他控製菌檢查，10g（ml）用於(yu) 沙門菌檢查，10g（ml）
用於(yu) 沙門菌檢查的陽性對照。需要進行沙門菌檢查的樣品，檢驗用量應為(wei) 30g（ml）。
十三、日常的實驗室裝備能否達到梭菌無氧的培養(yang) 要求？
答：可以。可以采用厭氧培養(yang) 盒（罐）。
十四、如果一個(ge) 產(chan) 品有兩(liang) 個(ge) 規格，是否可以取其中之一做陽性對照？
答：每個(ge) 規格均需進行陽性對照。
十五、藥品檢驗標準操作規範“已做驗證試驗的供試品，在檢查時刻不必再做陽性對照"如何理解？
答：該標準操作規範中在無菌檢查法中規定“供試品無菌檢查應進行陽性對照試驗"，表明不論是否進行了方法驗證，在產(chan) 品的每一次檢驗過程中，還進行陽性對照。
在控製菌檢查的大腸埃希菌項下，指出“已做驗證試驗的供試品，在該供試品檢查時不必再作陽性對照"。該規定僅(jin) 適用方法驗證與(yu) 供試品檢查同時開展的情況。2005年版藥典和2010年版藥典在控製菌檢查中均對陽性對照試驗有明確規定，“進行供試品控製菌檢查時，應做陽性對照試驗。"產(chan) 品檢驗中應以藥典規定為(wei) 準。
十六、藥典中關(guan) 於(yu) 純化水的微生物限度是：細菌、黴菌及酵母菌總數每1ml不得過100個(ge) 。這句話的意思是細菌總數每1ml不得過100個(ge) ，黴菌及酵母菌總數不得過100個(ge) ，是細菌+黴菌+酵母菌總數每1ml不得過100個(ge) 。如果是三者總數的話，那細菌總數限度是多少？黴菌及酵母菌總數限度又是多少？
答：是總數不得過100個(ge) 。沒有必要考慮各自的限度值。
十七、無菌檢查和微生物限度檢查中，產(chan) 品中規定的溶解液是否可以換成其他的溶液？
答：可以。
十八、抗真菌藥品的微生物限度檢查法
答：這類產(chan) 品的黴菌和酵母菌計數方法需要進行調整，可以根據產(chan) 品劑型的不同，選擇薄膜過濾法或培養(yang) 基稀釋法等方法。
十九、為(wei) 什麽(me) 在日常樣品檢測中還需要做陽性對照（國外不需要）？
答：為(wei) 了確保每一次檢測對可能存在的微生物都是有效的。
二十、對於(yu) 同一個(ge) 品種，藥典為(wei) 什麽(me) 不規定統一的檢測方法？
答：本版藥典進行過這樣的嚐試，也有某些品種已經收載了統一的檢測方法，如注射用頭孢類抗生素的無菌檢查。之所以沒有大量收載，主要是由於(yu) 檢測方法還沒有經過必要的複核。
將微生物檢驗的統一方法收載在品種的各論項下，始終是努力的方向。
二十一、測定純化水微生物限度時，每張濾膜過濾量是多少合適？需要先稀釋嗎？過濾完後需不需要衝(chong) 洗？假如我取10ml純化水通過雙杯體(ti) 封閉式薄膜過濾器過濾，每張濾膜上的計數是以5ml為(wei) 單位還是10ml為(wei) 單位？
答：過濾量應以培養(yang) 後出現的微生物數不超過100cfu/膜為(wei) 標準。一般可不稀釋。不需要衝(chong) 洗。每張濾膜的過濾量為(wei) 5ml。
二十二、細菌數為(wei) 100g/g的，樣品稀釋級隻做1:10,1:100的倍數就可以了嗎？
答：可以。
二十三、培養(yang) 時間3天，5天，可理解為(wei) 72小時，120小時嗎？
答：可以。這樣為(wei) 嚴(yan) 謹。