飼料粗脂肪的測定方法（索氏提取器脂肪測定儀）

飼料粗脂肪的測定方法（索氏提取器脂肪測定儀(yi) ）

【教學目標】
1.學會(hui) 各種飼料樣本的粗脂肪的方法。
2.學會(hui) 儀(yi) 器的使用
【教學重點】樣本的測定方法。
【教學方法】操作指導
【課時分配】6學時
【原理】索氏脂肪提取器中用乙mi提取試樣，稱提取物的重量，除脂肪外還有有機酸，磷脂、脂溶性Vit，葉綠素等，因而測定結果稱粗脂肪或乙mi提取物。
【分析步驟】
1）仲裁法使用索氏脂肪提取器測定。
索氏提取器應幹燥無水。抽提瓶(內(nei) 有沸石數粒)在105℃±2℃烘箱中烘幹60min，幹燥器中冷卻30min，稱重。再烘幹30min，同樣冷卻稱重，兩(liang) 次重量之差小於(yu) 0.0008g為(wei) 恒重。
稱取試樣1～5g(準確至0.0002g)，於(yu) 濾紙筒中，或用濾紙包好，放入105℃±2℃烘箱中，烘幹120min(或稱測水分後的幹試樣，折算成風幹樣重)，濾紙筒應高於(yu) 提取器虹吸管的高度，濾紙包長度應以可全部浸泡於(yu) 乙mi中為(wei) 準。將濾紙筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加無水乙mi60～100mL，在60～75℃的水浴(用蒸餾水)上加熱，使乙mi回流，控製乙mi回流次數為(wei) 每小時約10次，共回流約50次(含油高的試樣約70次)或檢查抽提管流出的乙mi揮發後不留下油跡為(wei) 抽提終點。
取出試樣，仍用原提取器回收乙mi直至抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去殘餘(yu) 乙mi。擦淨瓶外壁。將抽提瓶放入105℃±2℃烘箱中烘幹120min，幹燥器中冷卻30min稱重，再烘幹30min，同樣冷卻稱重，兩(liang) 次重量之差小於(yu) O.OOlg為(wei) 恒重。
2）結果計算


式中：m ——風幹試樣重量，g。
m1 ——已恒重的抽提瓶重量，g。
m2——己恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，g。
3）推薦法
⑴魯氏殘留法
①操作步驟
a.將脫脂濾紙裁成10×10cm2大小，疊成一邊不封口的紙包，用鉛筆編號，按順序排列於(yu) 培養(yang) 皿上，置於(yu) 105℃土2℃烘箱中烘2h，取出放於(yu) 幹燥器中冷卻至室溫，分別放入同一稱量瓶中稱重(m0，g)。
b.將2～5g風幹樣品(通過40目篩)用小藥匙小心裝入已經稱重的紙包中，封上包口。
按順序排列於(yu) 培養(yang) 皿中。置於(yu) 105℃±2℃烘箱中烘3h，取出放入幹燥器中冷卻至室溫，分別放入原稱量瓶中，稱至恒重(m1，g)。將樣品包放入抽提管中，倒入無水乙mi，使之剛超過樣品包高度，浸泡過夜。然後將浸泡過樣品的無水乙mi放入抽提瓶中，再重新向抽提管中倒入無水乙mi，使之浸沒樣品包。連接裝置，接通冷凝水，在70～80℃水浴鍋中回流6～8h，回流速度以每分鍾20mL左右為(wei) 宜。抽提完畢，取出樣品包，在通風處揮幹乙mi．剩餘(yu) 乙mi可進行回收。
c.將樣品包仍按原序號排列在培養(yang) 皿中，置於(yu) 105℃±2℃烘箱中烘2h，取出放入幹燥器中冷卻至室溫，再將樣品包放原稱量瓶中，稱至恒重(m2，g)。
②結果計算
粗脂肪＝ m1－m2×100%
m1－m0
式中，m0——濾紙＋稱量瓶重（g）；
m1——提取前樣品包＋稱量瓶重（g）；
m2——提取後樣品包＋稱量瓶重（g）。
上述兩(liang) 種方法都是以乙mi為(wei) 溶劑的提取方法，其優(you) 點是具有較好的準確度和精密度，尤其是測定粗脂肪含量在5%以下的樣品，用此法比較可靠。缺點是費工費時，反複提取需8～16h；另外乙mi不能將樣品中的全部脂肪提盡。這是因為(wei) 部分脂肪常與(yu) 蛋白質或碳水化合物等非脂肪成分結合。成為(wei) 結合態脂類，如脂蛋白、糖脂、磷酯等，同時樣品也是烘幹的，因乙mi難以滲入含水樣品的組織內(nei) 部。在烘幹樣品時，又應考慮到脂肪在高溫下易被空氣氧化等情況。
⑵脂肪測定儀(yi)
①操作步驟
a.打開恒溫加熱裝置開關(guan) ，控製工作溫度為(wei) 75℃。
b.用萬(wan) 分之一分析天平稱2g左右的樣品(準確至0.0002g) (m1)，放入濾紙筒內(nei) 烘幹。
c.用套筒夾將6個(ge) 濾紙套筒裝入浸提冷凝管內(nei) ，當確信套筒已被磁鐵吸牢後取下套簡夾。
d.用分析天平稱浸提杯重量(m2)，然後加入約50mL無水乙mi，用杯托將6個(ge) 浸提杯放在加熱板上，再將冷凝管提升機構搬下，使浸提懷與(yu) 冷凝管連接好。
e.事先接通浸提冷凝管的冷卻水，將濾紙筒置於(yu) “沸騰"位置。冷凝管應有良好的冷凝作用；
f.無水乙mi沸騰15min或30min(依樣品含油量而異)後，將濾紙筒提升到“衝(chong) 洗"位置，衝(chong) 洗30min或45min。
g.衝(chong) 洗結束後，關(guan) 閉冷凝管旋塞閥，回收乙mi。
h.鬆開冷凝管提升機構，取下浸提杯，並放入烘箱烘幹。
i.在幹燥器中冷卻浸提杯，然後用分析天平稱重(m3)。
j.按以下公式計算樣品中粗脂肪含量。
②測定結果的計算
粗脂肪＝W3－W2×100%
W1
式中 ：W1——風幹試樣重量，g。
W2 ——已恒重的浸提杯重量，g。
W3——己恒重的盛有脂肪的浸提杯重量，g。
6.3.3.7 重複性每個(ge) 試樣取兩(liang) 平行樣進行測定，以其算術平均值為(wei) 結果。粗脂肪含量在10%以上(含10%)允許相對偏差為(wei) 3%。粗脂肪含量在10%以下時，允許相對偏差為(wei) 5%。
【實訓作業(ye) 及思考題】
1.測定混合飼料、配合飼料、濃縮飼料或單一飼料中粗脂肪的含量，並寫(xie) 出實訓報告。
2.脂肪包的高度超過虹吸高度對測定結果有何影響？為(wei) 什麽(me) ？
3.脂肪測定儀(yi) 對飼料脂肪的測定有何優(you) 點?
4.對測定Z後放入105℃±2℃烘箱中需幹燥的包、瓶或杯有何要求？
5.測定Z後包、瓶或杯在105℃±2℃烘箱內(nei) 的幹燥時間為(wei) 什麽(me) 不能過長?過長是否會(hui) 影響測定結果?