生物安全櫃的使用及維護,注意這些!
(一) 準備工作
1.在開始工作以前,要清除生物安全櫃內(nei) 表麵的汙染。
2.將所有必需的物品置於(yu) 安全櫃內(nei) ,以盡可能減少雙臂進出前麵開口的次數。物品放置要注意以下幾點:
①II級生物安全櫃台麵前麵和後麵的進氣格柵不能被物品阻擋。
②所有物品應盡可能地放在工作台後部靠近工作台邊緣的位置,並使其在操作中不會(hui) 阻擋後部格柵。
③可產(chan) 生氣溶膠的設備(如:混勻器、離心機等)應靠近安全櫃的後部放置。有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子等體(ti) 積較大的物品,應該放在安全櫃內(nei) 的某一側(ce) 。
④潔淨的物品應放置在距離產(chan) 生氣溶膠器皿至少15 cm外,降低交叉汙染的可能性。
⑤容易受紫外線損傷(shang) 的實驗樣本可以在紫外線殺菌後的實驗之前放入。
⑥不要在工作區內(nei) 排放過多的物品。
3.關(guan) 閉操作前窗,打開生物安全櫃的紫外燈,對生物安全櫃工作台麵,側(ce) 壁表麵以及後壁內(nei) 側(ce) 進行殺菌處理。
4.稍微打開操作前窗,讓生物安全櫃工作區排氣幾分鍾之後再開始工作。
(二) 操作注意事項
1.在使用生物安全櫃時應穿著個(ge) 體(ti) 防護服並戴手套防止被汙染。在進行一級和二級生物安全水平的操作時,可穿著普通實驗服。手套應套在實驗服袖口外麵。有些操作可能還需要戴口罩和護目鏡。
2.在生物安全櫃內(nei) ,避免使用酒精燈等明火滅菌器。使用明火會(hui) 對氣流產(chan) 生影響,並且在處理揮發性物品和易燃物品時,也易造成危險。在對接種環進行滅菌時,可以使用紅外線電加熱器,或者幹脆使用一次性塑料接種環。
3.手和雙臂伸入到生物安全櫃中等待大約1min,以便安全櫃調整完畢並且讓裏麵的空氣“掃過"手和雙臂的表麵以後,才可以開始對物品進行處理。
4.工作時,盡量減少手臂的移動,移動時要緩慢,防止幹擾櫃內(nei) 氣流。在移動雙臂進出安全櫃時,需要小心維持前麵開口處氣流的完整性,雙臂應該與(yu) 工作區開口垂直地緩慢進出前麵的開口。
5.在工作台麵上的實驗操作應該按照從(cong) 清潔區到汙染區的方向進行,所有操作在工作台麵的中後部進行。
6.工作時,耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤放在安全櫃內(nei) 不能拿出安全櫃,否則在使用這些物品時雙臂就頻繁進出安全櫃,這樣會(hui) 幹擾安全櫃空氣屏障的完整性,從(cong) 而影響對人員和物品的防護。
7.一旦實驗過程中產(chan) 生溢灑物,用消毒紙巾置於(yu) 其表麵吸附清理。
8.盡量使安全櫃處於(yu) 持續工作狀態,並對所有物品進行表麵消毒處理,提供大程度的人員保護。從(cong) 安全櫃內(nei) 部拿取可能產(chan) 生汙染的物品時,要進行表麵消毒處理。
(三)使用完畢後的處理
1.係緊用過的生物廢物袋。
2.對安全櫃內(nei) 壁、後壁、工作台麵和前窗內(nei) 側(ce) 進行清潔和消毒處理。
3.由於(yu) 剩餘(yu) 的培養(yang) 基可能會(hui) 使微生物生長繁殖,因此在實驗結束時,包括儀(yi) 器設備在內(nei) 的所有物品都應清除表麵汙染,並移出安全櫃。
4.從(cong) 安全櫃內(nei) 移出手臂之前,要進行表麵消毒處理,然後垂直於(yu) 工作區開口緩慢地移出。
6.在每次使用後,要清除生物安全櫃內(nei) 表麵的汙染。工作台麵和內(nei) 壁要用消毒劑進行擦拭,所用的消毒劑要能夠殺死安全櫃裏的任何微生物。在每天實驗結束時,應擦拭生物安全櫃的工作台麵、四周以及玻璃的內(nei) 外側(ce) 等部位來清除表麵的汙染。在對目標生物體(ti) 有效時,可以采用漂白劑溶液或70%酒精來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑後,還用無菌水再次進行擦拭。
7.關(guan) 閉前操作窗口並開啟紫外燈。
(四)生物安全櫃內(nei) 溢灑的處理
處理溢灑物時不要將頭伸入安全櫃內(nei) ,也不要將臉直接麵對前操作口,而應處於(yu) 前視麵板的後方。選擇消毒滅菌劑時需要考慮其對生物安全櫃的腐蝕性。
如果溢灑的量不足1 ml時,可直接用消毒滅菌劑浸濕的紙巾(或其他材料)擦拭。
如果溢灑量大或容器破損,建議按如下操作:使生物安全櫃保持開啟狀態;在溢灑物上覆蓋浸有消毒滅菌劑的吸收材料,作用時間以發揮消毒滅菌作用,必要時,用消毒滅菌劑浸泡工作表麵以及排水溝和接液槽;在安全櫃內(nei) 對所戴手套消毒滅菌後,脫下手套;如果防護服已被汙染,脫掉所汙染的防護服後,用適當的消毒滅菌劑清洗暴露部位;穿好適當的個(ge) 體(ti) 防護裝備,如雙層手套、防護服、護目鏡和呼吸保護裝置等;小心將吸收了溢灑物的紙巾(或其他吸收材料)連同溢灑物收集到專(zhuan) 用的收集袋或容器中,並反複用新的紙巾(或其他吸收材料)將剩餘(yu) 物質吸淨;破碎的玻璃或其他銳器要用鑷子或鉗子處理;用消毒滅菌劑擦拭或噴灑安全櫃內(nei) 壁、工作表麵以及前視窗的內(nei) 側(ce) ;作用時間後,用潔淨水擦幹淨消毒滅菌劑;如果需要浸泡接液槽,在清理接液槽前要先報告主管人員;可能需要用其他方式消毒滅菌後再進行清理。如果溢灑物流入生物安全櫃內(nei) 部,需要評估後采取適用的措施。
(五)定期維護
1.每三個(ge) 月更換一次預過濾器。
2.每年更換一次紫外燈。
3.有下列情況之一時,應對生物安全櫃進行現場檢測:生物安全實驗室竣工後,投入使用前,生物安全櫃已安裝完畢;生物安全櫃被移動位置後;對生物安全櫃進行檢修後;生物安全櫃更換高效過濾器後;生物安全櫃一年一度的常規檢測。現場檢測應由有資質的專(zhuan) 業(ye) 人員按照生產(chan) 商的說明對每一台生物安全櫃的運行性能以及完整性進行評估,以檢查其是否符合標準要求。安全櫃防護效果的評估應該包括對安全櫃的完整性、HEPA過濾器的泄漏、垂直氣流的速度、工作窗口氣流流向和平均風速、負壓/換氣次數、氣流的煙霧模式以及警報和互鎖係統進行測試。還可以選擇進行漏電、光照度、紫外強度、噪音水平以及振動性測試。在進行這些測試時,檢測人員要經過專(zhuan) 門的培訓,采用專(zhuan) 門的技術和儀(yi) 器設備。強烈建議由有資質的專(zhuan) 業(ye) 人員來進行測試。
每周采用空氣落菌數相似的方法進行無菌檢查。
生物安全櫃在移動以及更換過濾器之前,清除汙染。常用的方法是采用甲醛熏蒸,應該由有資質的專(zhuan) 業(ye) 人員來清除汙染。